溶液 【解決方法Q&A/疑問攻略/ブログ】
Q&A：溶液について? 解決方法/評価
・ポリアクリルアミドゲルから切り出したゲルから直接ＰＣＲを行うにはどうしたらいいですか？分子生物学実験で樹木木部細胞より抽出したＲＮＡから逆転写したｃＤＮＡをもとに、ＤＤ法を行っております。７Ｍ尿素変性４％ポリアクリルアミドゲルで電気泳動をした後、標的とするバンド部位のゲルを切り出し、それを鋳型としてエタ沈等の精製は介さず直接ＰＣＲを行っているのですが、その際のゲルの扱い方はどうすればよいでしょうか？様々な実験書をあたってみましたが、統一的な見解が得られず、各々の手順の原理についても詳細な記述がなく困っております。これまでは切り出したゲルをエッペンドルフチューブ（1,5ｍｌ)に入れ、超純水50μlで溶かし、一晩室温で放置し、（すぐにＰＣＲを行わなければ４℃保存）、ＰＣＲの際にはこれを１００℃で１０分、ヒートブロックを用いてボイリングし、数μを採取して鋳型として使うという手順を用いておりましたが、ＰＣＲの成功率が（特に再度同じサンプルで試行した際に）あまりよくありません。この中で僕が具体的に疑問である点は二点で１、切り出したゲルを保存する溶液には何を用いるとよりサンプルにとって安定なのか？ 超純水orTEbuffer？→超純水であればＤＮＡseが失活されない点が大いに心配です。ＴＥbufferではＰＣＲの際、ＥＤＴAがポリメラーゼ活性を阻害する事が予想されます。ＰＣＲへ持ちこむのが５０μ系の反応液（ＴａＫａＲａＥｘＴａｑ）に対して１μなのでさして影響はないとは思いますが・・・。２、ゲルからＤＮＡがどのように溶出されるのか？→室温で放置する理由、ボイリングをする理由は？室温はＤＮＡにとっては不安定な状態だと思います。一晩という時間の理由も不明です。ボイリングによってゲルが一時的に溶かされるのは想像がつきますが、その際、１０分もの加熱でＤＮＡが安定であると保証できるでしょうか？また、これらの作業はＤＮＡ溶液をＴＥbufferにした際には超純水の時と比べて条件を変える必要はあるでしょうか？ＴＥのpH値が熱を加えることで変わってしまうような気がします。先述したプロトコルは先代の先生が残してくださったものなのですが、その方と連絡をとることが叶わないため、手順一つ一つの理由を知りえない状況です。皆さんのお力をお借りしたいです、よろしくお願いします。・有機の問題ですがお願いします 赤本の問題です（操作１）スルファニル酸（H2N-C6H4-SO3H）の結晶を温めた炭酸ナトリウム水溶液に溶かし、この溶液を冷やしながら亜硝酸ナトリウム水溶液を加え、さらに濃塩酸を加えると化合物Ｙが生じる（操作２）別の容器にジメチルアニリン｛(CH3)2N-C6H5｝を入れ、塩酸を加えて溶かす（操作３）（操作１）で合成したＹの溶液に（操作２の）溶液を加え、さらに水酸化ナトリウム水溶液を加えると、メチルオレンジの結晶が得られる。これら操作からメチルオレンジの構造式を導き出せという問題なのですが答えは（H3C）2-N-C6H4-N=N-C6H4-SO3Naですここで質問があります①操作１で炭酸ナトリウム水溶液を使った理由がわかりません。ジアゾ化に炭酸ナトリウム水溶液なんて使いませんしなぜでしょうか②操作２によってできた物体の構造式を教えてください③メチルオレンジの構造式を導くための化学反応式を教えてください、また操作３で水酸化ナトリウムはどうして必要だったのでしょうか？たくさんあってすいません、赤本の解答にはメチルオレンジの構造式が載ってっただけで解説がなかったので全くわからないです。入試も近いのでお願いします・高校化学です。化学を履修していないため、まったく分かりません。親切な方教えて下さい。1)～4)のpHを求めなさい。1) 0.01mol/ℓ塩酸水溶液2) 1)と同様の溶液を10倍希釈した溶液3) 0.01mol/ℓ水酸化ナトリウム水溶液4) 3)と同様の溶液を10倍希釈した溶液参考書を読んでもさっぱり理解できません。計算式もあれば添えてお願いします。・大学側から提出された課題です。文系だった為、化学を履修していません。高校化学です。どなたか教えて下さい。1. 純硫酸(100w/w％，密度1.8g/cm3)5mlに水を加えて100mlとした溶液のモル濃度を求めよ。2. 36.3w/w％濃塩酸(密度1.185g/cm3)を薄めて10w/w％希塩酸(密度1.104g/cm3)1リットルを作るには濃塩酸が何ml必要になるか。3. 2と同様の濃塩酸を薄めて、1モル濃度(mol/ℓ)希塩酸1リットル作るには濃塩酸は何ml必要になるか。計算式などがあれば、それも書いていただければ嬉しいです。よろしくお願いいたします。・模試の問題化学の先日行われた模試の中に分からない問題が2つあります。①0.10mol/Lの希塩酸550mlと0.10mol/Lの水酸化カリウム水溶液450mlを混合した水溶液のpHはいくらか？②0,10mol/Lの塩化バリウム水溶液200mlに、0.10mol/Lの希硫酸100mlを加えると、硫酸バリウムが沈殿した。沈殿を取り除いた後の溶液中に存在するバリウムイオンと塩化物イオンの比(Ba2＋ : Cl−)はいくらか？問題は以上なんですが、特に②が全く分からないので丁寧に説明して頂けると嬉しいです。またどうでもいい質問かもしれませんが②において、なぜ塩化バリウムに希硫酸を加えると沈殿が生じる反応が起こるのでしょうか？この反応の原因？も教えて下さい。・化学がわかる人よろしくお願いいたします!!凝固点の問題です。簡単な途中式もできればお願いいたします♪(1)エチレンを室温において過マンガン酸カリウムのアルカリ性溶液で酸化した時に生成する化合物の物質名と化学式を答えよ(2)(1)で得られた化合物44.8gを水250gの中に含む溶液の凝固点を求めよ.ただし、水の凝固点降下度Kf=1.86(K・kg/mol)とする。・モル濃度についてです。ブドウ糖3.6gを水100gに溶かした溶液の密度は1.01g/cm^3であった。この溶液のモル濃度を求めよとあるのですが、解き方を教えて欲しいです。分かりやすく回答して下さると助かります。・pH測定機について質問お世話になります。電極を用いたpH測定機についてですが、使用の度に電極を洗浄しないといけませんよね?普通に使う分には純水で洗い流すだけでいいと思いますが、例えば全自動式の定期的に液を採取して測定する(一日の測定頻度が多い)タイプの測定器の場合はどうでしょうか?金属イオンが溶けたものや塩基性の溶液を測定する場合は薄い硝酸を用いると聞いたことがあるのですが、純水ではやはり不十分なのでしょうか?硝酸を用いるにしても何か添加するべきなのでしょうか?ご存知でしたら教えてください。お願いします。・化学の問題です。1.000kgの水に109.5gのショ糖(モル質量342.3g/mol)を溶かした溶液の密度は、20.0℃で1.0376(g/cm3)である。同温度での純水の蒸気圧は23.37hPaである。このショ糖の、1)質量モル濃度2)モル濃度3)モル分率4)溶液の蒸気圧を求めよ。なお、水のモル凝固点降下定数はKt=1.858(K/mol・kg)とする。という問題です。分かる方、式などを踏まえて解説お願いします。・SUS304のオーステナイト系組織を観察するために10％シュウ酸溶液を用いた電解エッチングをしたいのですが、どのような機具を揃えればよいのか分かりません。どなたか分かる方教えて下さい。
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